李斯特菌检测技术的发展-实验与分析（上）

2016-07-11 14:02:03 来源：食品安全导刊

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摘要：本文比较分析了国内外李斯特菌的检测方法、不同标准限量值的差异。介绍了国内外李斯特菌快速检测技术的应用及存在的问题，对我国微生物快速检测的现状进行了概述，探讨了李斯特菌快速检测技术的未来发展方向，对李斯特菌检验方法探索及快速检测技术的发展具有一定的借鉴意义。

关键词：李斯特菌；快速检测；免疫学检测；分子学检测

Development of the detection of Listeria and rapid test internal and abroad
Wencas Tao

Beijing Longrun Biological Technology Co., Ltd.
Abstract: This paper describes the difference of detection methods and limits for Listeria monocytogenes at home and abroad and introduces the current application and problems of rapid detection technology of Listeria monocytogenes. The overview of the progress of rapid detection of microorganisms in China is presented in this paper. Meanwhile, this paper discusses the future development trend of rapid detection technology of Listeria monocytogenes. This paper has a certain significance for Listeria monocytogenes inspection and development of rapid detection technology in China.
Keywords;Listeria spp. ;test method ; immunoassay; molecular biological assay

李斯特菌（Listeria spp.）广泛存在于环境中，并且在很多食品有检出，该菌在低温的条件下仍能存活和增殖，其中单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)是食源性疾病的主要致病菌之一，也是食品安全控制的重要病原体，感染后会造成不同程度的人员死亡，受到各国的高度重视。传统方法检测费时费力而灵敏性较差，因此，快速、高效、灵敏可信的检测方法能够更加有效判定李斯特氏菌污染风险并且控制其危害。

1、李斯特菌的污染及危害
李斯特菌在环境中普遍存在，也是污染食品的主要病原菌，往往侵染肉类、蛋类、禽类、海产品、乳制品、蔬菜等食品。其中，单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)是食源性疾病的重要病原菌， WHO将其列为21 世纪四大食源性致病菌之一^[1]。单核细胞增生李斯特氏菌广泛存在于土壤、人和动物的粪便中，在4℃的环境中仍能生长繁殖，是冷藏食品中主要的病原菌之一，往往污染食品导致食源性疾病的暴发。近年来，单核细胞增生李斯特氏菌引起的食源性疾病事件时有发生（表1），并造成不同程度的人员死亡，受到各国的高度重视。

表1 近年来各国李斯特氏菌引起的食源性疾病情况
Table 1 The case of illness caused by food borne Listeria in recent years in different countries

时间	国家	污染食品	感染人数	致死率
1981	加拿大	沙拉制品	41	41%
1983	美国	巴氏奶	56	29%
1985	美国	干奶酪	142	33%
1983-1989	瑞士	软质干奶酪	122	33%
1994	美国	牛奶	52	0
1994-1995	瑞典	冷熏晕	9	25%
1998	美国	热狗	-	21人
1999	美国	热狗、熟肉污染	103(其中6名妇女流产)	-
2011	美国	香瓜	72	22%
2014	丹麦	调味肉卷、香肠、热狗	38	38%

2、国内外关于食品中李斯特菌限量的规定

李斯特菌极容易污染食品，其中冷藏食品和即食食品危害最为严重，各国均制定了食品中李斯特菌的限量值和监测计划。美国对即食食品中单增李斯特菌的限量规定为0/25g，并要求企业实施GHP和HACCP^［²^］。中国大陆2013年颁布的《食品中致病菌限量标准GB29921-2013》中规定^［³^］，在即食肉制品中，单增李斯特菌按照二级采样方法取样不得检出（n=5，c=0，m=0）。

表2 部分国家和地区对即食食品中单增李斯特菌的限量规定

Table 2 Limit regulation of Listeria monocytogenes in ready-to-eat foods from several countries and regions

国家	产品种类	评价
国家	产品种类	满意	可接受	不满意	潜在危害
欧盟	特殊医学目的即食食品和婴儿即食食品		n=10,c=0，0/25g
	能支持单核球增多性李斯特菌生长的即食食品, 其他为特殊医学目的和婴儿的即食食品		n=5,c=0，100CFU/g
	不能支持单核球增多性李斯特菌生长的即食食品,其他为特殊医学目的和婴儿的即食食品		n=5,c=0，100CFU/g
美国	即食食品		0/25g
日本	非加热肉食制品和天然奶酪		100 cfu/g
加拿大	即食食品（即食食品中不支持生长，在良好的加工规范条件下生产）		n=5, 100CFU/g
英国	所有即食食品	＜20 CFU/g	20-100 CFU/g	不适用	≥100 CFU/g
澳大利亚	货架期长的冷藏食品其他即食食品	0/25g 0/25g	0/25g ＜100CFU/g	不适用不适用	≥100 CFU/g
新西兰	货架期长的冷藏食品其他即食食品	0/25g 0/25g	0/25g ＜100CFU/g	不适用不适用	≥100 CFU/g

中国香港	冷藏食品（冷凝食品除外）或婴儿食品		0/25g

中国大陆	即食肉制品		n=5，c=0，0