
粮食及饲料中真菌毒素的检测方法可以分为三类:
一类是生物学检测法, 包括种子发芽试验、呕吐试验等,很不利于快速检测,已很少采用;
一类是理化检测法,薄层色谱法(TLC)和高效液相色谱法(HPLC)。TLC虽然简便,但灵敏度差;HPLC虽然灵敏度高,但样品处理烦琐,操作复杂,仪器昂贵,标准品耗用大。
另一类是免疫化学检测法,如ELISA方法和胶体金免疫层析方法。ELISA法特别适宜大批样品集中检测,胶体金免疫层析方法适合现场单个或少数样品即时检测。
真菌毒素胶体金检测试纸基于抗原抗体的免疫原理,利用纳米胶体金层析技术,在真菌毒素的现场检测时具有以下优势:
1) 单个样品即可检测,无需仪器设备,特别适合现场检测;
2) 灵敏度高: 免疫层析法可检出量可达ng级,ELISA法最低检出量可达pg级,并可定量测定。
3) 特异性强:抗体抗原的免疫反应特异性很强,结构类似物、荧光物质、有色物质对检测的干扰很小,可检测样本本身颜色深的产品,如玉米。
4) 操作简便,反应迅速:由于特异性强,简化了样品的预处理和提取纯化过程,同时操作步骤也非常简便,5~10分钟即可判读结果。
5) 结果判读简单,通过判读胶体金出线情况即可肉眼识别结果,重复性高,不易产生人为误差。
6) 稳定性好:干法试剂,稳定性好,常温下可储存18个月,方便储存运输;
7) 安全性高,污染少,成本低廉,不需要昂贵的测定仪器,所用试剂也相对较少,特别是因为灵敏度高,毒素标准品的浓度可以很低,减少了对检测人员和环境的潜在危害和污染。
以黄曲霉毒素B1快速检测为例,目前快检方法存在三种方法:
1、酶联免疫试剂盒Elisa;
2、胶体金快捷型---直接法;
3、胶体金精准型--萃取复溶法。
几种黄曲霉毒素B1快速检测方法对比 |
方法名称 | 优点 | 局限性 | 适用单位 |
黄曲霉毒素B1快速检测胶体金试纸卡快捷型---直接法 |
1、简便快速,5分钟出结果 2、样品处理时间非常短 3、携带方便,适用基层 4、可以单个样品逐一检测,不需要做曲线 5、无需复杂设备和专业知识,操作人员5分钟即可学会,即学即用 6、室温保存,保存期长 |
1、定性检测,只判断超不超标,不给具体数据 2、检测样品范围较窄,不能测含油较多的样品 3、用于提取的溶剂为甲醇,有一定的毒性 4、检测高灵敏度时稳定性弱于胶体金精准型 |
a.饲料生产加工企业 b.粮食谷物粗加工企业 c.工商质监部门用于快速筛查 d.畜禽养殖户自查 |
黄曲霉毒素B1快速检测胶体金精准型--萃取复溶法 |
1、与HPLC法对照,准确性非常好,有权威检测中心验证报告 2、检测样品范围非常广,凡是可能污染真菌毒素的样品(包括油类),均可用于检测 3、整个操作过程所使用的试剂均无毒无害 4、样本中毒素提取回收率高且稳定 5、样品本身颜色对检测结果影响小 6、可以通过调整稀释倍数准确地检测多个浓度梯度,可实现半定量检测 7、操作较简单,一般操作人员半小时即可学会,即学即用 8、室温保存,保存期长 |
1、定性检测,只判断超不超标,不给具体数据 2、操作时间比快捷型长 3、操作步骤多于快捷型 4、一张试纸只能测一份样品 |
a.粮油制品生产加工企业 b.食品加工贸易企业 c.香料调味品生产加工企业 d.食用油生产企业 e.国家/省市县级粮油监督检测中心(站) f.工商质监部门用于市场快速筛查 g.饲料生产加工企业 h.其他需检测真菌毒素的行业 |
酶联免疫试剂盒Elisa |
1、准确定量,有权威机构验证报告 2、批量样品,一次检测 3、采用直接竞争法,步骤简单 4、灵敏度高于胶体金法,检测范围广 5、检测值基本不受样品底色干扰 |
1、操作较复杂,需要专业人员操作 2、保存温度有限制,保存期一年 3、不适合基层现场检测 4、检测样品范围较窄,对于含油较多的样品,需另行设计样本处理方法 |
a.食品相关分析实验室 b.粮油监测检测中心 c.有条件的粮油饲料生产加工企业 |
真菌毒素常快速检测产品介绍 |
检测项目 | 快速检测方法 | 检测限和检测样品 | |
黄曲霉毒素B1快速检测方法 |
黄曲霉毒素B1快速检测胶体金试纸卡(快捷型---直接法) |
灵敏度: |
5ng |
检测样本: |
饲料、谷物、食用油、调味品、酱油、醋、发酵酒等 |
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黄曲霉毒素B1快速检测胶体金试纸卡(精准型--萃取复溶法) |
灵敏度: |
5ng | |
检测样本: |
饲料、谷物、食用油、调味品、酱油、醋、发酵酒等 |
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黄曲霉毒素B1快速检测酶联免疫试剂盒 |
灵敏度: |
1ng | |
检测样本: |
饲料、谷物等 |
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玉米赤霉烯酮快速检测方法 |
玉米赤霉烯酮快速检测胶体金试纸卡 |
灵敏度: |
60ng |
检测样本: |
饲料、谷物等 |
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玉米赤霉烯酮快速检测酶联免疫试剂盒 |
灵敏度: | 50ng | |
检测样本: |
谷物、玉米、饲料等 |
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呕吐毒素快速检测方法 |
呕吐毒素快速检测胶体金试纸卡 |
灵敏度: | 100ng |
检测样本: |
饲料、谷物 |
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呕吐毒素快速检测酶联免疫试剂盒 |
灵敏度: | 100ng | |
检测样本: |
谷物、玉米、饲料等 |
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伏马毒素B1检测方法 |
伏马毒素B1快速检测胶体金试纸卡 |
灵敏度: |
200 ng |
检测样本: |
饲料、谷物等 |
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T-2毒素快速检测方法 |
T-2毒素快速检测胶体金试纸卡 |
灵敏度: | 100ng |
检测样本: |
饲料、谷物等 |
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赭曲霉毒素A快速检测方法 |
赭曲霉毒素A快速检测胶体金试纸卡 |
灵敏度: | 10ng |
检测样本: |
饲料、谷物等 |
真菌毒素常快速检测产品使用方法 |
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样本准备:称取样品并加于配套的离心管中。 样品要求: A、谷物粮食等固体样本需先粉碎至20目筛 B、油或是发酵酒等液体样本直接称取 |
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样本前处理: 如为精准型精确度高,需吹干此萃取液后复溶,充分提取待检物质。 |
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样本检测:将未开封的试纸卡和检测样品恢复至室温。水平放置试纸卡,用滴管 吸取待检液,向试卡孔缓慢逐滴加入3滴不含气泡的检测液。 |
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结果判读:5分钟判断结果,10分钟后的结果仅作参考。 阴性:C线显色,T线肉眼可见,无论颜色深浅均判为阴性。 阳性:C线显色,T线不显色,或者T线隐隐约约,判为阳性。 |
上海快灵生物科技有限公司黄曲霉毒素B1快速检测试纸卡操作指南---精准型 上海快灵生物科技有限公司黄曲霉毒素B1快速检测试纸卡操作指南---快捷型 检测过程中常见问题解答: 一、 检测卡加入样品后不出水: 原因: 1、加样速度太快。
2、机器压壳时不均匀。 解决方法: 1、加样时缓慢逐渐滴加 2、稍用力按卡片上压加样孔与检测窗中间部分。如右图:
二、 检测限量不准: 原因: 在吹干的过程中因为日光和太高温度容易使液体挥发或样本分解,导致检出值与实际不符。 解决方法: 在吹干时避免阳光直射,吹干过程中不要使用高温,吹干后待杯体恢复至室温后再加入复溶液。 |