《食品安全导刊》刊号:CN11-5478/R 国际:ISSN1674-0270

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​荧光定量快检产品——

2016-10-12 16:33:19 来源: 食品安全导刊

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    □ 范炜 河北省动物卫生监督所
     □ 徐天舰 赤峰市饲料质量监督
                   □ 李楠 熊雅婷 北京维德维康生物技术有限公司
    荧光定量快检产品——林可霉素荧光定量快速检测试纸条
    林可霉素(Lincomycin)属于林可胺类抗生素,主要用链霉菌发酵得到,对革兰氏阳性菌有较强抗菌作用,对支原体也有抑制作用。林可霉素对敏感人群副作用较强,可引起消化道反应,如恶心、呕吐等,还可导致过敏反应,如皮疹、荨麻疹、多形性红斑等。该药物常作为饲料添加剂,预防动物疾病,不规范用药可导致在动物组织、动物产品以及乳品中残留,不仅影响动物性产品的加工生产,而且还会严重影响消费者的身体健康。农业部颁布的《动物性食品中兽药最高残留限量》(235号公告)规定了林可霉素在牛奶中的最大残留限量为150μg/kg。针对林可霉素的定量测定国际通用方法为采用仪器方法,仪器方法灵敏度高,但是操作复杂,费用昂贵,需要专门的技术人员进行操作,不宜推广。因此,急需建立一类准确、快速、简便的林可霉素检测方法。近几年,虽然胶体金免疫层析技术已经诞生,但由于胶体金标记抗体检测信号的局限性,限制了其方法学的灵敏度。荧光定量检测系统由于简单快速、即时定量,从而作为一项新的检测方法崭露头角。
    方法优势
    林可霉素荧光定量试纸条是北京维德维康生物技术有限公司自主研制出的荧光定量检测产品之一,根据标准曲线对样品中林可霉素含量进行定量检测,通过建立标准曲线可知,其IC50=28,线性定量范围:20~80ppb,检测限(LOD)为7.8ppb,定量限(LOQ)为20.7ppb。
    其标准曲线如图1所示。
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    将林可霉素荧光定量检测卡与已有的林可霉素胶体金检测卡、试剂盒等产品进行对比,比较其各项指标参数,结果见表1。通过比较发现,荧光定量检测卡弥补了胶体金无法进行定量检测的不足,在标准曲线内可以进行定量检测,同时具备了较高的灵敏度,为其检测准确度提供了保障。此外,与试剂盒相比,荧光定量检测卡达到了相同检出限水平,同时,在进行样品前处理时无需稀释处理,使操作变得更便捷。相比之下,荧光定量检测卡综合了高灵敏度定量检测性能,同时又具备快捷的操作能力,具有显著优势。
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    方法确证
    基于荧光定量检测卡的各项参数,再结合实际样品检测,对检测时间、回收率、精确度等进行对比验证及方法确证。
    检测时间为检测前将检测卡在50℃下孵育3min,加样10min后在检测配套的便携式仪器内读数,即可得出待检样品中药物的含量值。对于回收率和精确度的测量需分别在20种待测样品(包括不同地域不同批次)中添加不同药物浓度,并验证其回收率及精确度,结果见表2。
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    由表2可知,荧光定量检测卡的回收率和精确度均达到较好水平。
    为了证明荧光定量检测卡的实际应用情况,分别将空白样品以及添加不同药物浓度的样品进行仪器方法验证。根据SN/T 2218-2008《进出口动物源食品中林可酰胺类药物残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法》中所述的检测方法,选取HPLC-MS检测作为验证方法,比较两种检测方法的检测结果及回收率,结果如表3所示。
由表3所示,荧光定量检测卡的检测结果与仪器检测水平一致,当药物添加浓度达到40ppb时,荧光定量检测卡的回收率甚至超过HPLC-MS检测结果。说明荧光定量检测卡能够对药物残留进行定量准确检测。
相较于仪器方法的复杂操作和昂贵仪器,荧光定量检测卡只需简单处理样品,检测成本低、检测速度快、准确度高,对保障食品安全、实现现场快速检测具有重要意义。
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    讨论
    北京维德维康生物技术有限公司自主研发的荧光定量检测系统有效地解决了胶体金等快检方法信号局限性的问题,实现了食品中农药兽药残留、非法添加物、霉菌毒素以及污染物等有害物质浓度的准确定量检测。通过与胶体金试纸条、试剂盒以及仪器方法的对比分析,结果发现,荧光定量检测卡的准确度、灵敏度以及实用性均达到了较高水平,具有显著优势。荧光定量检测系统凭借着简单、快速、时效性强、准确度高,可定量检测、操作便捷、低成本等优势,能够最大限度地减少甚至避免各类食品安全事件带来的伤害,有效提高食品安全监管工作的效率,提升食品安全监管系统的完善水平,对确保大流通环境下的食品安全起到积极作用,引领食品安全快速检测技术发展的新方向。
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