色谱条件色谱柱采用250mm×4.6mm，5µm;柱的温度35℃;流量是1.0mL·min-1，检测的波长是265nm，经验的量是20µL。将乙腈设为A，0.08mol·L-1乙酸溶液设为B，梯度洗脱的流程是：0-10min，A由10%上升到60%，保持10分钟;20-20.05分钟，A由60%下降到10%，保持9.95分钟。

　　试验方法首先是对样品的提取，将5g的鱼肉放入50ml的离心管中，添加20ml的乙腈溶液和10g的烘干的无水硫酸钠，顺时针摇晃2分钟，静止放置10分钟，分离上清液。在剩余的残渣中加入20ml的乙腈，重复上述工序，并分离上清液。其次是对提取的样品进行脱脂处理，在进行蒸发至干以后，加入1.0ml的乙腈饱和正己烷进行去油净化处理，离心以后，提取最下层的乙腈液，经过过滤，使用高效液相色谱仪进行检测。

　　结果与讨论,在进行磺胺类、硝基呋喃类、喹诺酮等的分离过程中，要使用C18的反相柱，在使用的过程中，考察了四种色谱柱，其中考察相对最好的是Symmetry C18柱，因此，在进行实验的时候，要采用这种色谱柱。

　　流动相组成及洗脱程序的选择

　　有效的调节流动相的pH数值，可以抑制磺胺类、硝基呋喃类、喹诺酮等的弱碱解离现象，改变了色谱峰的保留时间。通过试验得出，当酸性过高的时候，磺胺类不容易分解，并损伤色谱柱;当酸性过低，色谱峰出现的拖尾的情况。在进行试验的时候，要选择0.08mol·L-1的乙酸溶液对流动相的酸度进行有效的控制与拖洗，选择合适的梯度条件，有效的进行了抗生素的分离，保证分离度大，峰形尖锐，对称性好(图1是抗生素的色谱图)。

图1 抗生素色谱图

　　提取液的选择

　　选择乙腈、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇等，按照合理的比例调试成混和溶液，通过试验证明：二氯甲烷、乙酸乙酯可以有效的提取出类脂物，很难发生脱脂反应。乙腈可以改变动物的蛋白质，可以有效的提取出动物身上的药物成分，是非常好提取剂。同时，加入少量的硫酸钠可以促进蛋白质的改变，预防样品变形等作用。净化的选择对不同类型、不同种类、不同填料量的化合物进行比较与分析，得出了基于不同的目标化合物要使用不同的净化方法。磺胺类、硝基呋喃类抗生素要使用中性氧化铝柱进行净化处理，选择的这种净化剂具有很强的吸附作用，表明是中性的，易于保留杂环类。喹诺酮类要使用C18固相萃取柱进行净化活动。

　　标准曲线和检出限

　　使用乙腈将一定量的1.0mL·L-1稀释成0.05,0.1,0.2,0.5的标准量，进行有效的测定。将峰面积A设为线性的回归，范围保持在0.05-1.0之间，得到结果如表1。计算出的检出限结构如表1。

　　方法的回收率和精密度

　　将六份的罗非鱼、鳙鱼、对虾空白样品，分别加入不同浓度的抗生素化合物进行有效的回收率试验过程，得到结果如表2，图2表示的是试验的色谱图。通过试验证明，这种方法可以有效的去除水产品中的残留抗生素。