显色培养基在检测食品中沙门氏菌的应用研究

2021-05-24 10:26:46 来源：食品安全导刊

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　　显色培养基在检测食品中沙门氏菌的应用研究

　　本文通过对显色培养基沙门氏菌检测方法进行研究，通过相关实践检测分析和对比，沙门氏菌是影响食品公共卫生安全的重要因素之一。

　　随着这些年的发展，显色培养基成为当前一种新型的食品沙门氏菌培养基。在以往培养基的基础之上，增加了一种新型的具有组合式的特异发色性酶底物，一旦特异酶在细菌发酵过程中显现出特异性的发色底物以后，那么当目标菌落呈现出不同颜色，此时就能对目标菌落进行有效的鉴别和分离措施，也可以通过计数的方式进行。

　　其中沙门氏菌有一种非常重要的性质就是食源性。目前，沙门氏菌在进行检测时依旧沿用传统生化的方式进行，这个过程包括了分离培养、增菌、生化鉴定、血清鉴定等多个步骤。这样的方式所需要的时间久，通常是需要一周的时间，并且操作的难度大，准确度低。为此，这些年以来沙门氏菌显色培养基由于其操作简单、具有很强的选择性、所需要的时间较短，从而被全面推广。这与其他显色培养基相比较而言，更能被人们所接受。通过总结这些年显色培养基在进行沙门氏菌检测时，结合技术人员所培养得出的成果，从而获得以下经验：

　　培养基的菌落种类

　　进口类沙门氏菌显色培养基对于市面上常见的几种进口沙门氏菌可以有以下几种：美国BD、法国AES、法国科马嘉、英国OXOID等品种，它们的共同特点是菌落小、沙门氏菌所实验的菌落颜色对比十分明显。进口沙门氏菌在进行显色培养基过程中使用最为广泛的属法国 CHROMagar 显色培养基，所呈现出颜色则为紫色[1]。

　　国产类的沙门氏菌显色培养基沙门氏菌培养显色培养基在使用过程中较为简便，从而降低了检测的整体工作量。我国许多培养基都是靠自主研发，当前，国产类的沙门氏菌显色培养基在使用过程中主要有以下三种销售量最多：广东环凯、北京陆桥以及青岛海博。其中北京陆桥的通过颜色可以判断出这跟法国科马嘉的显色培养基的效果是相同的；对于沙门氏菌会呈现出紫红色，那么不是沙门氏菌则呈现出蓝绿色或者是没有颜色。在2009年广东环凯沙门氏菌显色培养基获得了全国的发明银奖，对沙门氏菌其颜色则呈现出粉红色，如果是大肠杆菌或是大肠菌落则呈现出显蓝色，枸橼酸杆菌则会呈现出紫色，对于其他菌落显无色或者黄色。

　　沙门氏菌培养基应用研究

　　从1974年开始法国 CHROMagar 公司便开始进行显色培养基的相关研究，为此，从2000年开始沙门氏菌显色培养基就开始投入使用，对于所研究可以从两大方面进行分析：其一，沙门氏菌显色培养基跟以往的选择性的培养基进行比较，可以发现沙门氏菌培养基可以全面取代以往的选择性的培养基；其二，是属于国产类的沙门氏菌培养基与国外的沙门氏菌培养基对比实验。

　　培养基及试剂沙门氏、志贺氏、肠道菌、GN增液菌、亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）、琼脂（SS、HE）。北京陆桥生物技术有限责任公司所制定出培养基试剂：肠道综合双糖管以及对肠杆菌科鉴定进行编码。沙门氏菌显色培养基产地来自法国科马嘉公司，那么则由郑州的博骞生物技术研究所进行分装。对于沙门氏菌、大肠埃希氏菌以及志贺氏族进行诊断的血清选购来自兰州生物制品研究所。上面所使用的试剂都是在有效期内[2]。

　　所用仪器和设备生物安全柜、显微镜、电热恒温培养箱、电子天平、高压灭菌锅。

　　实验方法在实验过程中初了所使用的显微镜和培养基配置之外，具体的实验操作应该在100— 1000 级具有生物特性的洁净室内。

　　第一，菌株检测方法按照 GB/T4789— 2008 中相应操作规程进行；第二，菌株的筛选和鉴定经过初筛在 CAS、SS、HE 分离平板上挑取相应的疑似菌落接种双糖鉴别生化管，初筛符合者，血清玻片凝集试验和镜检，系统生化鉴别实验。

　　讨论

　　沙门氏菌成为引起人们食物中毒或者是导致肠道腹泻的病原菌之一，成为重要的肠道病原菌。其中通过添加了特异的显色底物的方式就能更快检测出样品中所含的沙门氏菌，从而快速地提高检测的准确率。当前沙门氏菌检测的方法依旧沿用之前的生化方法，其中包括了亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液增菌、分离培养、血清型鉴定生化鉴定等多个步骤，这个过程一般需要一个星期，操作起来比较繁琐，并且不能很好地保证和满足微生物检测要求，所以，要快速检查沙门氏菌显色培养基这个是非常重要的环节。通过显色培养基进行微生物鉴定的方法，成为这些年配置新型快速检测关键技术，就能直接根据沙门氏菌的实验菌落的颜色，从中获取相关的变化进行初步的鉴定，从而能有效减少其他的干扰因素。在肠道相关的诊断部门来看，其对食物的采集并不是很规范，对于培养基而言有其局限性等众因素的影响，从而使以往的检测分离方法的灵敏度降低。由于显色培养基具有高灵敏度、高效率等优点，作为一种新型的微生物检测技术，这种方式得到人们普遍的认可。对于沙门氏菌在 CAS 显色平板上，其所呈现出的菌落颜色非常容易辨别出来是紫色，然而不是沙门氏菌则会表现为蓝色或者是灰白色，则充分说明 CAS 平板的沙门氏菌检出率都普遍高于 SS以及HE 平板，从而有效简化相关的程序，节约时间，由此可见，在进行显色培养基时，是属于有价值的分离鉴定平板，可以作为以往平板的补充[3]。

　　结语

　　总而言之，对于CAS 平板而言其具有易鉴别、选择性好的特点，其最大的优势是对普通培养基的选择，尤其在面对突发事件的处理过程，通过选择CAS 平板的鉴定方式就能取得很好的结果。通过将显色培养基与以往的检测技术结合的方式能对食物性致病的菌落进行检测，能快速地获取到结果，最终成为微生物快速检测技术发展的重要方向。

　　参考文献：

　　[1]陈博, 滕昆仑, 卢勉飞,等. 高特异性沙门菌显色培养基性能评价[J]. 中国卫生检验杂志, 2018, 28(18):2189-2192.

　　[2]刘亚锋, 王则宇, 吴志洋,等. 一种新型B群链球菌显色培养基在孕妇产前B群链球菌检测中的应用效果研究[J]. 中国卫生检验杂志, 2020(8).

　　[3]程潇, 刘娟娟, 贾贞,等. 2种培养基对乳粉中沙门氏菌的定量检测比较[J]. 农业灾害研究, 2020, 010(002):121-123.

　　范志龙

　　河池市食品药品检验所

　　广西河池 547000